死體積是 HPLC 系統(tǒng)從注射點(diǎn)到檢測(cè)點(diǎn)之間的體積，不包括色譜柱。
因此，它包括進(jìn)樣體積、進(jìn)樣器體積、色譜柱前后連接管的體積、末端接頭和篩板的體積以及檢測(cè)器流通池的體積。
死體積可以通過用零死體積連接器更換色譜柱來測(cè)量。
通過注入非常少量的樣品，可以測(cè)量從注入時(shí)刻到*大峰高之間的時(shí)間。
這個(gè)時(shí)間乘以流速可以很好地估計(jì)系統(tǒng)死體積。

駐留體積負(fù)責(zé)梯度的時(shí)間延遲。
根據(jù)定義，它是混合室和色譜柱入口之間的梯度 HPLC 系統(tǒng)的體積。
這個(gè)體積在等度洗脫下當(dāng)然也存在，但在這種情況下，它對(duì)分離沒有影響。
它包括梯度混合器的體積、泵的連接管道、泵頭和止回閥、泵和進(jìn)樣器之間的管道、進(jìn)樣器本身以及進(jìn)樣器和色譜柱入口之間的管道。
啟動(dòng)梯度時(shí)，在梯度通過駐留體積之前，色譜柱不會(huì)改變洗脫液成分。
在此期間，色譜柱在等度洗脫下操作。
將梯度方法從一臺(tái)儀器轉(zhuǎn)移到另一臺(tái)儀器時(shí)必須注意。
如果駐留體積不同，即使方法和色譜柱相同，保留時(shí)間也可能不同。
駐留體積可以通過運(yùn)行從 100% 甲醇到 100% 甲醇 + 10 mg/L 苯乙酮的階梯梯度來測(cè)量。
UV 檢測(cè)器將檢測(cè)到 S 形跡線。
駐留體積等于進(jìn)樣和檢測(cè)器跡線半高之間的時(shí)間乘以流速。